Plný název analytu

BORRELIA BURGDORFERI

PRŮKAZ PROTILÁTEK IgG (sérum)

Název metody pro nálezy

S_Anti Borelia IgG

Synonymum názvu analytu

Antiboreliové protilátky IgG

Analytický princip stanovení

ELISA

Jednotky

RU/ml

Vyšetřovaný biologický materiál

Sérum

· odebírá se

Krev

· druh odběru

Srážlivá venózní krev

· odebírané množství (ml)

· manipulace s materiálem

§ Vzorek plné krve může být skladován až 7 dnů při teplotě +2⁰ až +8⁰C.

§ Po 7 dnech musí být provedena centrifugace a separace séra od krvinek, které musí být skladováno při teplotě pod -10⁰C.

· poznámka

K analýze nepoužívat silně hemolytické, ikterické nebo lipemické sérum.

Dostupnost vyšetření po doručení vzorku do laboratoře

(H=hodina, D=den, T=týden)

1 H

2 H

4 H

1 D

2-3 D

1 T

2-3 T

Referenční hodnoty (RH) (M = muž, F = žena, R = rok, M = měsíc, D = den)

Pohlaví

Věk od

Věk do

Dolní RH

Horní RH

Poznámka

F+M

15,99

§ IgG

§ Vzorky s hodnotami < 16 jsou hodnoceny jako NEGATIVNÍ

§ Vzorky s hodnotami ≥16 - < 22 jsou hodnoceny jako HRANIČNÍ

§ Vzorky s hodnotami ≥ 22 jsou hodnoceny jako REAKTIVNÍ (tj.pozitivní pro zvýšenou koncentraci protilátek)

Interpretace patologických hodnot

Vzorky reaktivní na protilátky proti boreliím typu IgG mají hodnotu ≥ 22 RU/ml. Tento typ protilátek se objevuje v pozdější fázi infekce. Mohou přetrvávat dlouhodobě jako známka prroběhlé infekce v anamnéze (anamnestické protilátky). Dlouhodobě přetrvávající výskyt protilátek ve třídě IgG (zpravidla ve zvýšených koncentracích) může souviset i s chronickým průběhem infekce.

Vzorky reaktivní na protilátky proti boreliím typu IgM mají hodnotu ≥ 1.100. Tento typ protilátek je produkován v čásné fázi onemocnění - vzestup začíná 1-3 týdny po infekci s maximem za 3-6 týdnů, k normě se navrací za 1-3 měsíce.. Jejich přítomnost je obvykle chápána jako marker akutně probíhajícího onemocnění Lymeskou boreliózou.

V případě reaktivity nebo hraničního nálezu je nutno doplnit vyšetření specifických antigenů borelií speciálním testem založeným na imunoblottingu (Western Blot) !!!

Poznámky

§ Lymeská borelióza (Lymeská nemoc) je klíšťaty (Ixodes ricinus) přenášené zánětlivé bakteriální onemocnění vyvolané rodem borelií patřící do řádu spirochet.

§ Borrelia burgdorferi (Bb) je mikroaerofilní gramnegativní spirocheta tenkého tvaru o rozměrech 0,2mm x 4-30mm, Buňky jsou spirálovitě stočené v pravidelných závitech vzdálených 2,2mm.

§ V Evropě má tzv.Borrelia burgdorferi sensu lato tři subtypy - Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia afzelii a Borrelia garinii.

Úskalí hodnocení sérologického nálezu

Seronegativita (Sn) vzorku u pacientů s Lymeskou boreliózou

§ Sn skutečná - B buňky netvoří specifické protilátky

§ Sn zdánlivá - koncentrace protilátek je nižší než je jejich minimální detekovatelné množství konkrétní laboratorní metodikou

§ Sn laboratorní - specifické protilátky jsou přítomny, ale jejich koncentrace je pod stanovenou hranicí reaktivity (např.jejich sekvestrace v imunokomplexech)

§ Sn hraniční (nejistá) - koncentrace protilátek tvoří hranici negativity a reaktivity

§ Sn falešně negativní !!!

§ V časném stádiu onemocnění

§ Opožděná serokonverze při nedostatečné tvorbě protilátek

§ Vliv časné antibiotické terapie

§ Bylo publikováno několik dobře dokumentovaných případů pozdního stádia LB s negativním sérologickým nálezem

Falešná pozitivita !!!

§ Jiná spirochetální onemocnění (např.syphilis, leptospirosis)

§ U žen v průběhu gravidity

§ Koincidence s přítomností revmatoidního faktoru nebo antinukleárních protilátek

§ Jiná onemocnění - SLE, sklerodermie, infekční mononukleóza, revmatoidní artritis aj.

§ U 10% zdravých osob (údaj pro ČR) - tato pozitivita stoupá s věkem

Při interpretaci sérologických testů zaměřených na průkaz antiboreliových protilátek je třeba respektovat následující skutečnosti

§ Zjištění zvýšeného titru protilátek IgG proti B.burgdorferi je pouze jedním z parametrů v diferenciálně diagnostickém procesu a nemůže být hodnocen izolovaně. Diagnóza Lymeské nemoci musí být stanovena kombinací klinické symptomatologie u pacienta, epidemiologické situace a ostatních laboratorních vyšetření a po vyloučení jiné možné etiologie.

§ Sérologický test může být negativní, byla-li krev odebrána příliš brzy resp.před vytvořením protilátek.

§ Negativní výsledek sérologického vyšetření nemocného s klinickou diagnózou LB může být způsoben podáním ATB na počátku onemocnění, a to i z jiné indikace.

§ Negativní výsledek sérologického vyšetření nevylučuje onemocnění LB.

§ Druhý odběr krevního vzorku by neměl následovat dříve než za 4-6 týdnů po prvém.

§ Při konvenčním diagnostickém postupu by měl sérologický nález:

§ Vykazovat vyšší titr protilátek

§ Vykazovat vzestup těchto protilátek ve dvou oddělených vzorcích krve získaných v odstupu několika týdnů a analyzovaných ve stejné laboratoři.

§ Výška titrů protilátek neodpovídá závažnosti ani aktivitě onemocnění (vysoké titry prokazujeme i u asymptomatických osob).

Literatura:

1. Bartůněk P at al.:Lymeská borelióza:možnosti a meze interpretace sérologických nálezů. Prakt.Lék, 78, 1998, č.11, s.611-614

2. Bartůněk P at al.:Diagnostika lymeské boreliózy. Prakt.Lék, 80, 2000, č.4, s.207-209

3. Votava M.:K interpretaci sérologických nálezů. Prakt.Lék, 80, 2000, č.4, s.183-187

4. Firemní literatura

Plný název analytu						:	BORELIE - PROTILÁTKY IgG (sérum)

Název metody pro nálezy						:	S_Anti Borelia IgG
Synonymum názvu analytu						:	Antiboreliové protilátky IgG
Analytický princip stanovení						:	CLIA
Jednotky						:	AU/ml
Vyšetřovaný biologický materiál						:	Sérum
· odebírá se						:	Krev
· druh odběru						:	Srážlivá venózní krev
· odebírané množství (ml)						:	3
· manipulace s materiálem						:	§ Vzorek plné krve může být skladován až 7 dnů při teplotě +2⁰ až +8⁰C. § Po 7 dnech musí být provedena centrifugace a separace séra od krvinek, které musí být skladováno při teplotě pod -10⁰C.
· poznámka						:	§ K analýze nepoužívat silně hemolytické, ikterické nebo lipemické sérum.
Dostupnost vyšetření						:	Rutinní
Referenční hodnoty (RH) (M = muž, F = žena, R = rok, M = měsíc, D = den)
Pohlaví	Věk od		Věk do		Dolní RH			Horní RH	Poznámka
F+M	0	R	99	R				10.0	§ Vzorky s hodnotami do 10.0 jsou hodnoceny jako NEGATIVNÍ § Vzorky s hodnotami od 10 do 14,9 jsou hodnoceny jako HRANIČNÍ · Vzorky s hodnotami nad 14.9 jsou hodnoceny jako REAKTIVNÍ (tj.pozitivní pro přítomnost specifických protilátek)
Interpretace patologických hodnot:

Vzorky reaktivní na protilátky proti boreliím typu IgG mají hodnotu nad 14,9 AU/ml. Tento typ protilátek je produkován v pozdní fázi onemocnění - asi za 6-7 týdnů po infekci. Jejich přítomnost je obvykle chápána jako marker prodělaného onemocnění Lymeskou boreliózou.