Plný název analytu	:	Stanovení vybraných antigenů Cl. difficile A TOXINŮ (průkaz ve stolici)
Název metody pro nálezy	:	F-Průkaz antigenů (stolice)
Synonymum názvu analytu	:	CoproStrip Clostridium difficile
Analytický princip stanovení	:	Kombinovaný kvalitativní imunochromatografický test (fa.SavyonDiagnostic) detekující přítomnost glutamátdehydrogenázy (GDH), toxinu A a toxinu B ve vzorcích lidské stolice na principu jejich vazby na specifické monoklonální protilátky.
Jednotky	:	Kvalitativní průkaz (přítomen – nepřítomen)
Vyšetřovaný biologický materiál	:	Stolice
§ Odebírané množství	:	Vzorek tekuté stolice cca 1-2 ml, u formované stolice 1-2 g
§ Manipulace s materiálem	:	§ Testovány mohou být čerstvé nebo zmrazené vzorky stolice. § Vzorky mohou být uchovávány při teplotě 2 až 8 °C po dobu nejdéle 24 h § Pro delší skladování nutno vzorek zamrazit při teplotě -20 °C . § Vzorky by neměly být opakovaně zmrazovány a rozmrazovány.
Poznámka	:	Odběrovou soupravu vydá laboratoř na vyžádání, jedná se o kontejner pro parazitologické vyšetření se šroubovacím uzávěrem.
Dostupnost vyšetření po doručení vzorku do laboratoře	:	1 H	2 H	4 H	1 D	2-3 D	1 T	2-3 T
Interpretace testu	:	Viz. tabulka v textu
Kód v Sazebníku výkonů	:	82117

Indikace testu

§ Průjmová onemocnění související s antibiotickou léčbou nebo pseudomembranózní kolitidou.

Charakteristika infekčního agens

§ Etiologickým agens je anaerobní bakterie Clostridium difficile.

§ Hlavním rizikem pro rozvoj infekce je antibiotická léčba. Pokud je střevní mikroflora antibiotickou léčbou narušena, může se rozvinout střevní infekce.

§ Virulentními faktory jsou toxin A a toxin B, ne všechny kmeny Cl.difficile musí produkovat alespoň jeden typ toxinu. Ke vzniku klasické psedomembranózní kolitidy dochází součinností obou toxinů.

§ Vysoce specifickým markerem je enzym glutamát dehydrogenáza (GDH), jehož průkaz souvisí s přítomností kmene Cl.difficile vždy, pozitivita toxinu jednoho typu event. obou typů současně prokazuje infekci Cl.difficile.

Epidemiologie

§ Laboratorní průkaz toxigenního kmene Cl.difficile je klíčový pro adekvátní léčbu.

§ Indikací pro vyšetření u hospitalizovaného pacienta jsou tři a více průjmovitých stolic denně.

§ Toto onemocnění vzniká jako nozokomiální infekce v souvislosti s podáním antibiotik, především klindamycinu, širokospektrých aminopenicilínů (amoxicilin + kyselina klavulanová) a cefalosporinů (cefoxitin).

Laboratorní diagnostika infekce

§ Souprava CoproStrip Cl.difficile je rychlý imunochromatografický test simultánně detekující glutamát dehydrogenázu (GDH), toxin A a toxin B ze vzorku lidské stolice.

§ Pro odběr vzorků se použije 1 – 2 g (1 – 2 ml) stolice odebrané do čisté a suché nádobky bez jakýchkoliv transportních medií nebo roztoků.

§ Vzorek se skladuje v lednici při 2 – 8°C, nejdéle 72 hodin. Pro delší skladování se doporučuje vzorek zamrazit při teplotě -20°C

Interpretace testu

GDH	Toxin A	Toxin B	Interpretace
POZ	POZ	POZ	Pozitivní nález
POZ	POZ	NEG	Pozitivní nález
POZ	NEG	POZ	Pozitivní nález
NEG	POZ	NEG	Pozitivní toxin A – dop. doplnit anaerobní kultivaci
NEG	NEG	POZ	Pozitivní toxin B – dop. doplnit anaerobní kultivaci
NEG	POZ	POZ	Pozitivní toxiny A+B – dop. doplnit anaerobní kultivaci
POZ	NEG	NEG	Netoxický typ Cl.difficile
NEG	NEG	NEG	Negativní nález
Kontrolní linie testu je negativní			Dop. nový odběr stolice a zopakování testu

Poznámka

§ Pozitivita testů po přeléčení clostridiové infekce antibiotiky není důvodem k další terapii, kolonizace může přetrvávat po klinicky účinné terapii. Rozhodující je klinický stav.

§ Sporné případy je doporučeno kombinovat s anaerobní kultivací Cl.difficile ze vzorku stolice, nikoliv z výtěru do transportního media.

Literatura

1. Současné přístupy v laboratorní diagnostice střevních infekcí vyvolaných Clostridium difficile, str. 334 -337, Zprávy centra epidemiologie a mikrobiologie 9/2011

2. Pracovní návod výrobce Savyon Diagnostics Ltd.

3. Votava M. a kol.: Lékařská mikrobiologie speciální, str. 150 – 151, Neptun 2003